細胞凍存是細胞生存的條件之一,細胞凍存都是采用的低溫 液氮罐 保溫特性,目的就是我們的細胞離開生長環境依然可正常生存,使用我們的 液氮罐 儲存細胞可以避免細胞污染現象,
細胞凍存是細胞生存的條件之一,細胞凍存都是采用的低溫
液氮罐保溫特性,目的就是我們的細胞離開生長環境依然可正常生存,使用我們的
液氮罐儲存細胞可以避免細胞污染現象,起到保護細胞的作用。
方法:
試劑:0.25%胰酶、造就基
凍存液的配置:添加甘油或者DSMO,濃度達到20%,配好凍存液以后在4攝氏度才可以生存。
一:將消化細胞懸液至離心管內。
二:1000rpm離心10分鐘,棄上清液。
三:沉淀的情況下可以添加掩護液,然后將懸浮液分至凍存管內,每管控制在1ml左右,然后密封起來,一定要密封嚴,否則會造成爆炸現象。
四:最后貼上標簽,表明細胞名稱及日期。
五:溫度流程:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時)→氣態氮(30分鐘)→液氮。
最后提醒大家操縱液氮時應該避免出現凍傷現象,一定要觀察液氮量,量少的話,隨時注意增補液氮量,不然的話會影響標本的活性,一般30立方的液氮可以用1.5月,所以我們需要多留心些就好。